Cos'è il test delle endotossine?

Cos'è il test delle endotossine?

Le endotossine sono molecole idrofobe che fanno parte del complesso lipopolisaccaridico che forma la maggior parte della membrana esterna dei batteri Gram-negativi.Vengono rilasciati quando i batteri muoiono e le loro membrane esterne si disintegrano.Le endotossine sono considerate i principali contributori alla risposta pirogenica.E i prodotti parenterali contaminati con pirogeni possono portare allo sviluppo di febbre, induzione di una risposta infiammatoria, shock, insufficienza d'organo e morte nell'uomo.

Il test delle endotossine è il test per rilevare o quantificare le endotossine dei batteri Gram-negativi.

I conigli vengono inizialmente utilizzati per rilevare e quantificare le endotossine nei prodotti farmaceutici.Secondo l'USP, l'RPT prevede il monitoraggio dell'aumento della temperatura o della febbre dopo l'iniezione endovenosa del farmaco nei conigli.E 21 CFR 610.13 (b) richiede un test pirogeno sul coniglio per prodotti biologici specifici.

Negli anni '60, Fredrick Bang e Jack Levin scoprirono che gli amebociti del granchio a ferro di cavallo si coagulano in presenza di endotossine.ILLisato di amebociti di Limulus(o lisato di amebocita di Tachypleus) è stato sviluppato di conseguenza per sostituire la maggior parte degli RPT.Su USP, il test LAL è indicato come test dell'endotossina batterica (BET).E il BET potrebbe essere effettuato utilizzando 3 tecniche: 1) la tecnica del gel-coagulo;2) la tecnica turbidimetrica;3)la tecnica cromogenica.I requisiti per il test LAL comprendono pH, forza ionica, temperatura e tempo di incubazione ottimali.

Rispetto a RPT, BET è rapido ed efficiente.Tuttavia, BET non potrebbe sostituire completamente RPT.Poiché il test LAL può essere interferito da fattori e non è in grado di rilevare pirogeni non endotossinici.