Il test dell'endotossina batterica (BET) viene eseguito nella maggior parte dei laboratori moderni in condizioni controllate come fattore importante per evitare interferenze.
Adeguatatecnica asetticaè importante durante la preparazione e la diluizione degli standard e la manipolazione dei campioni.Vestizionepratica al di fuori dei normali dispositivi di protezione individuale di laboratorio (DPI) non costituisce un problema, a meno che il prodotto in esame non richieda specifiche considerazioni sulla sicurezza da parte degli analisti a causa della tossicità o dell'infettività.Guantidovrebbero essere privi di TALC, poiché il TALC può contenere livelli significativi di endotossine.Lettori di piastre, bagnimaria e blocchi di calore seccoutilizzato per l'incubazione del campione deve essere posizionato su un banco da laboratorio, lontano da condotti di riscaldamento, ventilazione e condizionamento dell'aria (HVAC), da vibrazioni significative e dal traffico del laboratorio che potrebbero influenzare i risultati del test.Tempi e condizioni di conservazione del campionedovrebbero essere determinati e successivamente documentati, se necessario, per garantire che i risultati dei test accurati possano essere generati nei tempi previsti.
Ad esempio, se il laboratorio riceve un campione di acqua per preparazioni iniettabili (WFI) o in lavorazione, deve essere refrigerato o può rimanere a temperatura ambiente e per quanto tempo?Prima dell'analisi, si consiglia di miscelare adeguatamente i contenitori dei campioni primari prima di rimuovere le aliquote del test per l'analisi diretta o la successiva diluizione.
Bioendo Test dell'Endotossina Batterica, gli esperimenti sono inclusimetodo del coagulo di geltest del test delle endotossine etest quantitativo delle endotossine, il test del test dell'endotossina con il metodo del coagulo di gel è un rilevamento qualitativo dell'endotossina, questi esperimenti richiedono che i materiali di consumo siano elaborati per la depirogenazione, come provette di reazione prive di endotossina, provette di diluizione e punte prive di pirogeni;il rilevamento quantitativo dell'endotossina ha un test cinetico cromogenico dell'endotossina, un test cinetico turbidimetrico dell'endotossina, questi esperimenti richiedono che i materiali di consumo debbano soddisfare il livello massimo di endotossine inferiore a0,005UE/ml(0,001 EU/ml), come provette prive di endotossine, punte prive di pirogeni e micropiastre prive di pirogeni, persino serbatoi prive di pirogeni.A proposito, se si trattano i campioni, il contenitore deve essere una bottiglia per campioni priva di endotossine.
Nei test sulle endotossine, l'interferenza può derivare da diverse fonti, come componenti della matrice del campione, reagenti del test o apparecchiature.
Per evitare interferenze nell'esperimento, è possibile adottare le seguenti misure:
1. Preparazione del campione: un'adeguata preparazione del campione è essenziale per un test accurato delle endotossine.
La matrice del campione deve essere accuratamente testata e ottimizzata per garantire la compatibilità con il test dell'endotossina.
In particolare, le sostanze interferenti come lipidi e proteine dovrebbero essere rimosse o ridotte al minimo utilizzando tecniche appropriate come la filtrazione o la centrifugazione.
2. Controlli positivi e negativi: è essenziale includere controlli positivi e negativi nel test per monitorare eventuali interferenze.
I controlli positivi confermano la funzionalità del test, mentre i controlli negativi rilevano qualsiasi contaminazione o interferenza da parte dei componenti del test.
3. Controllo di qualità: il controllo di qualità deve essere eseguito su tutti i reagenti, le apparecchiature e l'acqua utilizzati nel test.
Ciò garantisce che i reagenti siano esenti da contaminazione da endotossine e funzionino correttamente.
4. Standardizzazione: il test deve essere standardizzato per garantire che tutti i risultati siano comparabili e riproducibili.
Ciò comporta l'uso di una curva standard per calibrare il test e l'uso di tecniche standardizzate per la preparazione, l'incubazione e il rilevamento del campione.
5. Convalida: il test deve essere convalidato per garantire che sia specifico, sensibile e affidabile.
Ciò comporta il test di una serie di campioni, compresi quelli noti per contenere endotossina, per determinare l'accuratezza e la precisione del test.
Seguendo queste misure, è possibile ridurre al minimo le interferenze e ottenere test accurati delle endotossine.
Orario di pubblicazione: 01-dic-2022
